和创造活动的宝库，美国国会图书馆收集、整理、保存美国历史文献，并特别重视记录美国创造性的文献，保存蕴藏有全人类知识精华的各种信息，即从全世界收集各种类型的资料--书、刊、地图、报纸、图片、录音、录象等。除了生物医学技术、人类营养、诊断医疗以及农业技术和兽医学等分别归国家医学图书馆和国家农业图书馆负责收藏外，国会馆收集的资料内容涵盖各个领域与专题。
馆藏如果细分的话，其中收藏了240万件藏品的法律图书馆堪称世界之最，除了世界上最珍贵的法律书籍和最丰富的外文法律资料外，还收有美国建国以来全部的立法机构出版物。
非洲与中东组拥有60万卷当地非拉丁字母的书籍；亚洲组有中文、日文、朝文以及亚洲之外最大的藏文藏品共200万件；俄文文献75万件，为俄罗斯之外最大的藏家；伊比利亚、拉丁美洲和加勒比资料1000万件（包括图书、杂志、报纸、地图、手稿、招贴画、录音、乐谱等）。
善本部收藏在北美洲首屈一指，达70多万件，内含西半球印刷的首批图书；还有最早的儿童书籍和儿童圣经（1763年出版）。
最小的书只能用针尖方能打开，而最大的书《美洲的鸟类》有1米